Амплисенс впч

Вирус папилломы человека (ВПЧ)

Вирус папилломы человека относится к эпителиотропным вирусам. К местам его наиболее частого поражения относится кожа, слизистая половых органов, ротовая полость. В настоящее время известно более 100 типов ВПЧ. По клиническим проявлениям их делят на кожные и аногенитальные типы.

Папилломавирусы — это единственная группа вирусов, которые индуцируют образование опухолей в естественных условиях. В частности, способствуют перерождению папилломы в карциному.

По степени злокачественности папилломавирусы подразделяют на 3 группы: ВПЧ высокого, среднего и низкого онкогенного риска. Наиболее распространены следующие типы ВПЧ высоко онкогенного риска: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 52, 58, 59, 67.

Пути передачи ВПЧ:

  • Бытовой путь заражения (проникновение вируса через микротравмы в коже);
  • Половой (доказано, что риск заражения выше у сексуально активных женщин);
  • Возможна передача вируса от матери к ребенку во время родов.
Клинические проявления

Одни типы вирусов ВПЧ вызывают всем знакомые «бородавки» (доброкачественные разрастания покровных тканей), другие — остроконечные кондиломы половых органов. Последние также относятся к доброкачественным разрастаниям ткани, но в ряде случаев способны озлокачествляться, проще говоря, приводить к онкологическому заболеванию.

Инкубационный период при инфицировании половой сферы ВПЧ колеблется от 3 до 8 месяцев. В большинстве случаев ВПЧ-инфекция бывает кратковременной и самостоятельно разрешается за 12—24 месяца (если не происходит повторного инфицирования), что определяется активностью противовирусного иммунитета.

Как правило, вирусом папилломы женщина может заразиться в юные годы при начале половой жизни, но вирус далеко не сразу и относительно редко проявляет свою патогенность, оставаясь в течение многих лет в скрытом (латентном) состоянии. Активизация вируса и возникновение злокачественного новообразования шейки матки может произойти много лет спустя — в 50—70-летнем возрасте под влиянием самых разнообразных провоцирующих факторов.

Диагностика

ВПЧ инфекция — очень коварна, и связанные с нею предшествующие раку изменения не только не вызывают никакого беспокойства и дискомфорта, но часто не обнаруживаются при обычном осмотре у гинеколога. Тест на вирус папилломы человека (ВПЧ-тест) является надежным помощником врачу: выявление вируса обращает особое внимание врача на проблему возможного развития рака, вынуждает провести дополнительные обследования. Следует добавить, что на данный момент во многих европейских странах используется цервикальный скрининг, включающий в себя регулярное обследование женщин на вирус (ВПЧ-тест) и/или ПАП-тест (определяет изменения в клетках, связанные с вирусом). Каждая женщина проходит такое обследование раз в 3—5 лет. Опыт ряда стран показал, что подобная практика позволяет снизить вероятность заболеть раком шейки матки более чем в 1 000 раз.

Использованные источники: www.synevo.by

СМОТРИТЕ ЕЩЕ:

  Результат исследования днк впч

  Впч по крови кто делает

  Впч это анализ на мазок или на кровь

  Перекись водорода от впч

  Анализы по выявлению впч

  Впч 51 норма

ВПЧ 16 типа у женщин

Папилломавирусы — это группа ДНК-содержащих вирусов, поражающих клетки эпителия органов и тканей: кожи, слизистых оболочек.

В чём опасность ВПЧ 16 типа для женщин?

Характерная особенность папилломавирусов — способность индуцировать образование различных эпителиальных опухолей.

Формы повреждения тканей, вызванных ВПЧ, многообразны. Встречаются бессимптомные и малозаметные: кератозы, дисплазии. Бывают клинически ярко выраженные: бородавки, папилломы, кондиломы. Большинство абсолютно безопасны. Без лечения они остаются пожизненным косметическим дефектом или исчезают самостоятельно (самоизлечение).

Но иногда доброкачественные поражения могут перерождаться в злокачественные опухоли – карциномы.

  • Карцинома или эпителиальный рак – это злокачественная опухоль, которая развивается из изменённых клеток эпителия различных тканей.

На сегодняшний день установлено, что папилломавирусная инфекция – ведущая причина развития рака шейки матки. При клинически выраженном цервикальном раке ВПЧ высоких рисков онкогенности выявляется в 95-100% случаях.

Известно около 100 серотипов папилломавирусов. Около 17 считаются онкогенными.

  • В группу наиболее высокого риска входят ВПЧ типов: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 46, 51, 52, 56, 58, 59 и 68.
  • Вирусами низкого риска остаются ВПЧ типов: 6, 11, 42, 43, 44.

Для женщин особенно опасны ВПЧ 16 и 18 типов: они чаще всего вызывают рак шейки матки.

На ВПЧ 16/18 приходится 70% ассоциированного с папилломавирусной инфекцией цервикального рака. Причём наиболее распространённый плоскоклеточный рак связывают с ВПЧ 16 типа. А редко встречающийся железистый рак – с ВПЧ 18 типа.

Заражение ВПЧ 16 типа

Распространённость папилломавирусной инфекции чрезвычайно велика: ДНК тех или иных (иногда сразу нескольких) типов ВПЧ обнаруживаются более чем у 80% взрослого населения.

Мукозотропные ВПЧ, в том числе серотип 16, относят к инфекциям, передающимся половым путём (ИППП). Вероятность заражения через кровь, предметы быта, тем более воздушно-капельным путём ничтожна.

Пути заражения ВПЧ 16 типа:

  • Половой путь: традиционный, оральный, нетрадиционный сексуальный контакт с инфицированным партнёром.
  • Внутриутробно: заражение плода от инфицированной матери через плаценту или околоплодные воды.
  • Во время родов: заражение новорожденного при прохождении по поражённым кондиломами родовым путям матери.

Что происходит после заражения ВПЧ 16 типа?

Подавляющее большинство инфицированных ВПЧ не подозревают о случившемся и в дальнейшем не имеют никаких осложнений.

Более того, до 75% сексуально активных женщин на протяжении жизни заражаются различными типами ВПЧ по нескольку раз. Однако у 2/3 женщин активная инфекция через некоторое время частично или полностью выводится из организма системой иммунитета.

«Остатки» вирусов «консервируются» в чувствительных тканях в виде ДНК ВПЧ и наследуются внутри заражённого клона клеток на протяжении всей жизни носителя. В момент ослабления местного или общего иммунитета скрытая ВПЧ-инфекция «просыпается», рецидивирует, проявляется клинически.

Причины снижения иммунитета к ВПЧ 16 типа у женщин:

— беременность;
— возрастные изменения, связанные со старением организма;
— острые, хронические гинекологические, соматические, воспалительные, инфекционные заболевания;
— ИППП: хламидиоз, генитальный герпес, ЦМВИ, трихомониаз, гонорея, сифилис, ВИЧ, др.
— гормональный дисбаланс;
— нейроэндокринные, метаболические нарушения, ожирение;
— операции, травмы, аборты, тяжёлые роды;
— хронический стресс, физическое истощение;
— лечение цитотоксическими, иммуносупрессивными препаратами;
— агрессивная инсоляция, ионизирующее облучение, лучевая терапия;
— курение, алкоголизм.

Длительное малопродуктивное персистентное течение ВПЧ-инфекции возможно только на фоне дефектов иммунитета.

Симптомы ВПЧ 16 типа у женщин

  • Латентная инфекция – симптомов нет.

Присутствие вируса можно выявить лишь с помощью современных иммунохимических или молекулярно-биологических методик, которые определяют наличие в организме антигенов или ДНК ВПЧ.

У женщин даже бессимптомное течение ВПЧ 16 типа может инициировать рак шейки матки.

ВПЧ-инфекция персистирует (то обостряется, то стихает), протекает малозаметно, на фоне хронического вульвогинита, эндоцервицита, псевдоэрозии шейки матки. Иногда пациентку беспокоят жжение, зуд в генитальной области. Возможны скудные аномальные выделения из влагалища, дизурические явления.

В цервикальных мазках появляются: койлоциты, лейкоциты, атипичные клетки; иногда — патогенная флора (сочетание ВПЧ-инфекции с другими ИППП вполне закономерно).

В гистологических препаратах цервикальной слизистой видны патологические изменения структуры эпителия шейки матки. При опухолевой трансформации появляется дисплазия (неоплазия, ЦИН).

ВПЧ-инфекция у женщин – это папилломатоз или кондиломатоз вульвы, влагалища, шейки матки, аногенитальной области.

ВПЧ 16 типа и рак шейки матки

В состав папилломавирусов высокого риска входят специфические структурные белки-онкопротеины Е6 и Е9. Они способны инактивировать внутриклеточный иммунитет. Их особенно много в ВПЧ 16 типа. Вызывая генетическую нестабильность, онкопротеины ВПЧ 16 инициируют мутацию клеток, развитие интраэпителиальной неоплазии, рака шейки матки.

Дисплазия шейки матки или цервикальная интраэпителиальная неоплазия (ЦИН/CIN) – это нарушение структуры эпителиальных пластов цервикальной слизистой. Патологический процесс обусловлен аномальным размножением (пролиферацией) атипичных, трансформированных ВПЧ, клеток.

Цервикальная дисплазия – раннее проявление папилломавирусной инфекции, вызванной ВПЧ 16 и 18 типов.

Умеренная и тяжёлая дисплазия (ЦИН 2-3) – предраковое состояние. Без лечения к 40-49 годам на фоне возрастных изменений иммунитета она может малигнизироваться в клинически выраженный (инвазивный) рак. Злокачественное перерождение прогрессирует очень медленно, годами.

Своевременное выявление и адекватное лечение ЦИН полностью предотвращает развитие рака шейки матки.

Вот почему каждая женщина, ведущая половую жизнь, должна делать плановую скрининг-диагностику ВПЧ и сдавать мазок на онкоцитологию (ПАП-тест).

ДНК-диагностика ВПЧ 16 типа у женщин

Материалом для данного исследования служат: влагалищный мазок или цервикальный соскоб.

Есть два основных молекулярных метода выявления и верификации серотипов ВПЧ:

1. ПЦР — метод полимеразной цепной реакции.

Позволяет найти в исследуемом материале ДНК определённого типа ВПЧ. ПЦР-тест высокочувствителен. Он выявляет даже минимальное количество вирусного генетического материала.
Но!
По его результатам сложно отличить активный инфекционный процесс от безопасного латентного ВПЧ-носительства.

Расшифровка результатов ПЦР-теста на онкогенные ВПЧ 16/18 типов

Использованные источники: aptekins.ru

СМОТРИТЕ ЕЩЕ:

  Результат исследования днк впч

  Смысл прививки от впч

  Как не заразиться впч бытовым путем

  Грибок впч

  Впч тест в гинекологии

Местные иммуносупрессорные повреждения при персистенции вируса папилломы человека

О статье

Автор: Кедрова А.Г. (ФГБОУ ДПО «Институт повышения квалификации ФМБА», Москва)

Заболеваемость раком шейки матки (РШМ) в России составляет 13–15 случаев на 100 тыс. населения, что обусловливает актуальность проблемы совершенствования профилактики и ранней диагностики предрака и РШМ. Персистенция онкогенных типов вируса папилломы человека (ВПЧ) предрасполагает к развитию РШМ. У большинства людей ВПЧ-инфекция протекает бессимптомно и более чем в 90% случаев может быть нивелирована самостоятельно в течение 1–2 лет. Поражения, которые не устраняются иммунной системой, могут сохраняться в течение нескольких десятилетий, что приводит к интеграции вирусных белков в геном клетки и развитию рака. В статье рассматриваются возможности использования иммуномодулятора инозин пранобекса при лечении ВПЧ. Преимущество препарата перед другими иммуномодуляторами состоит в том, что он обладает действием в отношении различных звеньев иммунитета и нормализует функциональные способности клеток. Наличие у него прямого противовирусного действия позволяет снижать вирусную нагрузку, что при одновременной нормализации функциональной активности макрофагов приводит к ускорению элиминации папилломавирусной инфекции. Представлены данные собственных исследований, которые продемонстрировали, что эффективность инозин пранобекса зависит от длительности курса и при 28-дневном режиме позволяет достигать элиминации вируса у 72,4% больных в течение 6 мес.

Ключевые слова: легкая дисплазия шейки матки, интраэпителиальные поражения низкой степени, инозин пранобекс, папилломавирусная инфекция, рак шейки матки.

Для цитирования: Кедрова А.Г. Местные иммуносупрессорные повреждения при персистенции вируса папилломы человека // РМЖ. Мать и дитя. 2017. №26. С. 1971-1976

Local immunosuppressive damage in the human papillomavirus persistence A.G. Kedrova Institute for Advanced Training of Federal Medical Biological Agency, Moscow The incidence rate of cervical cancer in Russia is 13-15 cases per 100 thousand of people, which causes the urgency of discussing the problem of improving prevention and early diagnosis of precancer and cervical cancer. The persistence of oncogenic types of human papillomavirus (HPV) predisposes to the development of cervical cancer. In most people, HPV infection is asymptomatic and in more than 90% of cases it can be reduced on its own within 1-2 years. Lesions that have not been eliminated by the immune system can persist for several decades, leading to the integration of viral proteins into the cell genome and the development of cancer. The article considers the possibilities of using the immunomodulator inosine pranobex in the treatment of HPV. The advantage of the drug over the other immunomodulators is that it effects on various parts of the immune system and normalizes the functional abilities of the cells. It’s direct antiviral effect allows reducing the viral load, which, while simultaneously normalizing the functional activity of macrophages, leads to an increase in the elimination of papillomavirus infection. The authors present the data of their own studies that demonstrate the effectiveness of inosine pranobex which depends on the duration of the course and under the 28-day regimen allows to achieve virus elimination in 72.4% of patients for 6 months.

Key words: mild cervical dysplasia, low-grade intraepithelial lesions, inosine pranobex, papillomavirus infection, cervical cancer.

For citation: Kedrova A.G. Local immunosuppressive damage in the human papillomavirus persistence // RMJ. 2017. № 26. P. 1971–1976.

Статья посвящена возможностям коррекции местных иммуносупрессорных повреждений при персистенции вируса папилломы человека. Показана эффективность использования иммуномодулятора инозин пранобекса при лечении вируса папилломы человека.

Введение

Скрининг

Методика и возможности кольпоскопического исследования

В статье представлены современные данные по этиологии, патогенезу, эпидемиологии, классифи.

Статья посвящена особенностям лечения кандидозного кольпита. Показано, что рациональным вы.

Использованные источники: www.rmj.ru

ВАС МОЖЕТ ЗАИНТЕРЕСОВАТЬ:

  Результат исследования днк впч

  Как не заразиться впч бытовым путем

  Перекись водорода от впч

  Титр днк впч

  Пцр впч 16 18 количественное определение

Новые возможности ранней диагностики и профилактики ВПЧ-ассоциированных поражений шейки матки

«Медицинский совет. Генекология» 2015

В.Н. Прилепская, д.м.н., профессор, Г.Р. Байрамова, д.м.н., Е.А. Коган, д.м.н., профессор, В.Ф. Чернова, А.Н. Окушко, к.м.н.
Научный Центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова Минздрава России, Москва

В данном обзоре рассматривается взаимосвязь вируса папилломы человека и его роль в развитии цервикальных интраэпителиальных неоплазий (CIN) и рака шейки матки. Представлены данные о наиболее информативных методах диагностики (иммуногистохимические, молекулярно-генетические и др.) и лечения ВПЧ-ассоциированных поражений шейки матки.

Ключевые слова: вирус папилломы человека, цервикальная интраэпителиальная неоплазия, жидкостная цитология, онкопротеины Е6 и Е7, р16INK4а/Ki67 двойное окрашивание, ВПЧ-тестирование, микроРНК

Рак шейки матки (РШМ) занимает первое место в структуре онкологических заболеваний женских половых органов и четвертое место среди всей онкопатологии (после рака молочной железы, колоректального рака и рака легкого) [1]. Ежегодно во всем мире регистрируется более 470 000 новых случаев рака шейки матки и более 270 000 случаев заканчиваются летальным исходом [2].

В России в 2012 г. число новых случаев РШМ составило 15 342 (6,3%), смертность от рака шейки матки — 7 371 (5,3%) случаев [1]. В последние годы РШМ все чаще встречается в молодом возрасте. По данным ВОЗ, заболеваемость РШМ в возрастной группе 15-39 лет в мире составила 111 503 случая, в России — 3 954, в группе 40-44 года — 66 308 и 1 564 случая соответственно [1]. По данным ряда исследований, РШМ у женщин в возрасте 30-39 лет составляет 78%, в возрасте 20-29 лет — 21% и только в 1% случаев диагностирован в возрасте моложе 20 лет [3].

Эпидемиологические и молекулярно-биологические данные указывают на важную роль вируса папилломы человека в возникновении цервикальных интраэпителиальных неоплазий и рака шейки матки [4]. Почти в 100% случаев у больных РШМ, подтвержденным гистологическим методом исследования, выявляется вирус папилломы человека (ВПЧ) высокоонкогенных типов. В настоящее время общепризнанным считается, что ВПЧ является одним из ведущих факторов развития РШМ. По данным C.M. Wheeler и соавт. (2006) через 3 года после инфицирования ВПЧ CIN II-III развивается у каждой четвертой женщины (27%) [5]. В России папилломавирусная инфекция диагностируется у 15,5% женщин, в США — у 28,6%, в Европе — 2-12% [6]. Вирус папилломы человека — ДНК-содержащий вирус, в состав которого входят два структурных гена (L1 и L2) и семь функциональных генов (E17). Известно более 200 типов ВПЧ, более 40 из них способны поражать слизистые оболочки половых органов [7]. ВПЧ подразделяются на высокоонкогенные (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 46, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82) и низко-онкогенные (6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61, 70, 72, 81) типы вируса. Исследования L. Giannella и соавт. (2015) [8] показали, что у женщин с гистологически верифицированным диагнозом CIN 3 в 63,6% случаев выявляется ВПЧ 16 типа, в 7% — ВПЧ 33 типа, в 6,2% случаев — ВПЧ 18 типа и в 5,4% — ВПЧ 31 типа. Вместе с тем авторы показали, что ВПЧ 16 типа чаще встречается в возрасте до 35 лет [8]. В ряде исследований показано, что в 70% случаев инвазивный РШМ обусловлен ВПЧ 16 и 18 типов [9].

Особенностью ВПЧ-инфекции является тот факт, что в силу эпителиотропности вируса он не обнаруживается в крови, а выработка антител иммунной системой отмечается далеко не у всех инфицированных больных [10]. При этом уровень антител очень низок и не способен обеспечить длительный и надежный иммунитет. Это связано со способностью ВПЧ «ускользать» от иммунной системы макрорганизма, что позволяет ему длительно персистировать ввиду своих эволюционно приобретенных особенностей (репликационный цикл ограничен эпителием, нет виремии и цитолиза, локальная иммуносупрессия за счет вирусных белков) [11, 40]. Течение ВПЧ-инфекции зависит от состояния иммунной системы, одно из самых неблагоприятных течений — персистенция вируса [12, 41]. Персистенция высокоонкогенных типов ВПЧ более двух лет является наиболее опасным фактором прогрессии предрака шейки матки. При персистенции ВПЧ 16 типа риск развития CIN составляет 40-50%; при выявлении ВПЧ 26 типа — 30-40%; 31, 58, 82 типов ВПЧ — 20-30%; 18, 33, 35, 51, 52 типов ВПЧ — 10-20% [13].

Учитывая высокую распространенность РШМ, показатели заболеваемости которого занимают третье место в мире среди женщин репродуктивного возраста [14], диагностика предраковой патологии шейки матки на стадии интраэпителиальной неоплазии является глобальной актуальной проблемой. В настоящее время разработка методов и систем ранней диагностики CIN является первостепенной задачей здравоохранения.

Для ранней диагностики CIN широко применяют цитологический метод Pap-тест и молекулярные методы выявления ДНК ВПЧ [15, 42].

Во многих странах с целью ранней диагностики и снижения заболеваемости РШМ разработаны скрининговые программы, включающие рутинное проведение цитологического метода исследования Pap-тест (тест по Папаниколау).

В настоящее время в странах Европы и США цитологическое исследование рекомендовано проводить 1 раз в 3 года, начиная с возраста 21 год или спустя 3 года от начала половой жизни [16]. В России на сегодняшний день нет четкой программы организованного цитологического скрининга РШМ. Приказом Министерства здравоохранения РФ от 12.11.2012 №572н регламентированы лишь общие положения о целесообразности проведения ежегодных профилактических осмотров женщин с цитологическим исследованием мазков с экзо- и эндоцервикса.

Диагностика ВПЧ-ассоциированных заболеваний шейки матки должна быть комплексной и базироваться на проведении ряда исследований: выявление ДНК ВПЧ с помощью реакции гибридизации вирусной ДНК с РНК-зондом (Digene-тест, Cobas HPV Test), выявление ДНК ВПЧ с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с типированием и определением количества геномных эквивалентов вируса; цитологическое исследование (традиционная или жидкостная); определение онкопротеинов Е6 и Е7; оценка экспрессии онкопротеинов p16/Ki67 иммуноцитохимическим (ИЦХ), иммуногистохимическим (ИГХ) методами; расширенная кольпоскопия; гистологическое исследование биоптата шейки матки.

Однако на сегодняшний день данные о специфичности и чувствительности всех перечисленных методов неоднозначны.

Digene-тест позволяет выявить не только наличие ВПЧ, но и определить его клинически значимую концентрацию, что дает возможность клиницистам оценить прогноз и выработать тактику ведения пациента. Другим международным референтным тестом, который также используется для генотипирования ВПЧ, является тест-система Cobas. Данный метод обеспечивает качественную детекцию 14 высокоонкогенных типов ВПЧ: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68, а также генотипирование ВПЧ 16 и 18 типов в этом же анализе [17]. S. Phillips и соавт. (2015) провели сравнительный анализ ВПЧ-тестирования 407 образцов с гистологически подтвержденным диагнозом CIN различной степени тяжести на тест-системах Cobas и Digene. Показана корреляция между степенью тяжести плоскоклеточных интраэпителиальных поражений и наличием ВПЧ высокоонкогенных типов — чувствительность тест-системы Cobas составила 90,6%, Digene-теста — 86,1%, специфичность — 92,9 и 91,8 соответственно [18].

По данным Американского общества по кольпоскопии и цервикальной неоплазии (ASCCP), внесены изменения в рекомендации для первичного скрининга: Cobas-тест был одобрен для первичного скрининга женщин старше 25 лет с цитологическим заключением ASCUS (атипические клетки плоского эпителия неясного значения), а также может быть использован у женщин старше 30 лет с отсутствием патологических изменений по данным цитограммы [19].

В нашей стране также используется метод ПЦР диагностики в режиме реального времени, который позволяет провести генотипирование и количественное определение 21 типа ВПЧ (HPV КВАНТ — 21) — 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 44, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82, 6, 11. Метод основан на реакции амплификации, в ходе которой молекулы праймеров связываются с фрагментами ДНК вируса в образце и в среде с добавлением катализаторов, под воздействием температуры происходит образование дочерних комплементарных двухцепочечных молекул ДНК. Метод ПЦР в реальном времени отличается тем, что после каждого цикла амплификации производится подсчет количества амплифицированной ДНК.

По данным ряда авторов, для определения дисплазии высокой степени и РШМ необходимо проводить цитологическое исследование в сочетании с тестированием на ВПЧ, чувствительность достигает более 96% [20].

В последние годы помимо традиционной цитологии активно внедряется жидкостная цитология (ЖЦ) — высокоспецифичный метод. Компьютеризированная система скрининга РШМ на основе жидкостной цитологии способствует обеспечению качества забора, хранения и транспортировки материала, качества приготовления и окраски препаратов и оптимизации использования рабочего времени цитолога при просмотре препаратов. Внедрение в практику метода жидкостной цитологии позволит сохранить все забранные клетки и исключить возможность потери образца [21, 22]. Кроме того, один и тот же образец, взятый для ЖЦ, может быть использован для детекции ВПЧ высокого онкогенного риска и определение ИЦХ методом онкомаркеров CIN.

Известно, что пусковым моментом неопластического процесса шейки матки является интеграция ВПЧ в геном клетки-хозяина, в ходе которого нарушается считывание генов Е1 и Е2, регулирующих экспрессию онкопротеинов Е6 и Е7. Экспрессия специфических онкобелков Е6 и Е7 является необходимым условием злокачественного роста цервикальных клеток. Установлено, что гены Е6 вызывают деградацию белков-супрессоров генов р53 и ВАХ, предотвращают апоптоз и деградацию тирозин-киназы, активацию теломеразы и подавляют выработку интерферона [24]. Е7 взаимодействует с продуктами гена-супрессора ретинобластомы (RB) и способствует высвобождению транскрипционного фактора E2F, стимуляции клеточной пролиферации, синтезу р16 (^К4а) [25]. Исследования ряда авторов показали, что обнаружение м-РНК, кодирующих онкопротеины Е6 и Е7 вируса папилломы человека высокого онкогенного риска, является более специфическим предиктором персистирующей инфекции, чем обнаружение ДНК ВПЧ [26, 27]. По данным F. Karlsen (2009), специфичность показателей онкопротеинов Е6 и Е7 для LSIL (низкая степень плоскоклеточного интраэпителиального поражения) составляет 80% [28]. Доказано, что экспрессия онкопротеина Е7 коррелирует со степенью тяжести неопластического процесса шейки матки [29].

В последние годы одним из перспективных методов диагностики ВПЧ-ассоциированных поражений шейки матки является определение экспрессии маркеров пролиферации р16 и Ki 67, которые в свою очередь позволяют определить не только наличие вирусных белков в клетке, но и степень нарушений клеточной регуляции в ответ на персистенцию вируса в клетке. Известно, что белок р16 (INK4A) [30, 43] является продуктом гена CDKN2A и подавляет активность циклин-зависимых киназ 4 и 6, которые регулируют G1-фазу клеточного цикла. Экспрессия этого белка в нормальных клетках ограничена, однако при ВПЧ-инфекции онкобелок Е7 связывается с белком супрессором опухолей ретинобластомой (RB), что приводит к деградации последней и, как следствие, к избыточной экспрессии р16 [25]. Выявление атипичных клеток плоского эпителия шейки матки, экспрессирующих одновременно р16 и маркер пролиферации Ki67, указывает на индуцированное дисрегулирование клеточного цикла и обеспечивает более точную диагностику поражений высокой степени тяжести. Первые исследования по определению р16 и Ki67 показали высокую специфичность метода [31]. H. Ikenberg и соавт. (2013) провели обследование 27 349 женщин из 196 медицинских центров в возрасте от 18 до 65 лет (средний возраст 39,9±11,4 года), которым был проведен цитологический скрининг, ВПЧ-тест и определение экспрессии р16 и Ki67 иммуно-гистохимическим методом. Пациенткам с аномальными цитологическими мазками и/или положительным ВПЧ-тестом, и/или положительной экспрессией р16 и Ki67 выполнялась расширенная кольпоскопия (n=2301) и прицельная биопсия шейки матки (по показаниям). Диагноз CIN2+ был установлен в 205 биоптатах шейки матки. При этом окраска цитологических препаратов двойным иммуноцитохимическим методом показала наибольшую чувствительность по сравнению с мазком, окрашенным гематоксилин-эозином — 86 и 68,5% соответственно (р

Использованные источники: medi.ru

СМОТРИТЕ ЕЩЕ:

  Смысл прививки от впч

  Впч по крови кто делает

  Впч это анализ на мазок или на кровь

Папилломавирусная инфекция (ВПЧ)

Цервикальный скрининг и ВПЧ-тестирование

Цервикальный скрининг – это систематическое проведение тестирования с целью выявления патологии шейки матки у бессимптомных женщин.

Цервикальный скрининг включает несколько этапов, которые представляют собой различные исследования, которые следуют друг за другом так, что все вместе они действуют как сито, отсеивая женщин низкого риска и оставляя только женщин высокого риска развития рака шейки матки, имеющих поражения шейки матки, требующие вмешательства. Чтобы цервикальный скрининг был максимально эффективным и экономичным, он должен включать два вида тестов: скрининговые и подтверждающие.

Сравнение скрининговых и подтверждающих тестов:

Современные стратегии скрининга основываются на сочетании двух методов – ПАП-теста и ВПЧ-теста. В зависимости от возраста обследуемых женщин, достатка населения и оснащенности лабораторной службы, в разных странах используют различные алгоритмы скринига.

Сравнение различных алгоритмов скринига, применяемых в разных странах:

Последний вариант оказался не только наиболее эффективным, но и наименее затратным. Такой подход позволяет значительно снизить количество трудоемких и дорогостоящих цитологических исследований, давая возможность улучшить их качество. В РФ следует рекомендовать организовывать скрининг по 2-му или 3-му алгоритму.

ПЦР в реальном времени — один из предпочтительных методов выполнения ВПЧ-теста. Залогом достоверного результата является соблюдение правил взятия, транспортировки и хранения биоматериала для исследования, экстракции ДНК и проведения ПЦР.

Транспортные среды и биоматериалы

У женщин забирают образцы цервикального эпителия в Транспортную среду с муколитиком (ТСМ) или, в случае одновременного проведения жидкостной цитологии, в среду для жидкостной цитологии, например, CytoScreen (Италия) или PreservCyt (США). Также возможно проведение ВПЧ-теста с использованием соскоба/мазка из влагалища, в том числе полученного самостоятельно. Практикуется выявление ДНК ВПЧ в биопсийном материале слизистой шейки матки. У мужчин получают соскоб эпителия уретры и помещают его в Транспортную среду с муколитиком (ТСМ).

В зависимости от используемого биоматериала рекомендуется применять следующие наборы реагентов для экстракции ДНК:

  • для соскобов слизистых оболочек урогенитального тракта: АмплиПрайм ДНК-сорб-АМ
  • для биоптатов слизистой: ДНК-сорб-С
  • для образцов жидкостной цитологии: ДНК-сорб-Д

Амплификация и детекция

АмплиСенс® ВПЧ ВКР скрин-титр-FL

Базовым набором реагентов для проведения ВПЧ-теста в рамках цервикального скрининга является АмплиСенс® ВПЧ ВКР скрин-титр-FL, дизайн которого позволяет:

  • суммарно определять количество ДНК 12-ти генотипов ВПЧ, относящихся к ВПЧ высокого канцерогенного риска
  • наиболее корректно интерпретировать уровень клинической значимости той или иной вирусной нагрузки в конкретной клинической ситуации
  • контролировать валидность биоматериала, взятого для анализа (благодаря оценке количества ДНК человека в образце)

Дизайн набора реагентов «АмплиСенс® ВПЧ ВКР скрин-титр-FL»:

Использованные источники: www.interlabservice.ru